Journal des sciences vétérinaires et du diagnostic médical

Détermination simultanée du tryptophane, de la kynurénine et de la niacine dans le sérum des vaches laitières périparturientes par chromatographie liquide haute performance avec détection par barrette de diodes

Liane Hüther, Julia Hartwiger, Caroline Drong, Ulrich Meyer et Sven Dänicke

Détermination simultanée du tryptophane, de la kynurénine et de la niacine dans le sérum des vaches laitières périparturientes par chromatographie liquide haute performance avec détection par barrette de diodes

Le tryptophane est un acide aminé essentiel et un substrat pour d'importantes voies biochimiques, par exemple la production du neurotransmetteur sérotonine ou la production de kynurénine et de nicotinamide via la voie de la kynurénine qui peut être induite par l'enzyme tryptophane 2,3-dioxygénase (TDO) via les hormones glucocorticoïdes ou par l'indoleamine 2,3-dioxygénase (IDO) après activation immunitaire. Le rapport kynurénine/tryptophane étant considéré comme un indicateur d'un système immunitaire activé, nous avons développé une méthode analytique pour la détermination simultanée de la kynurénine, du tryptophane et de la nicotinamide dans le sérum via la chromatographie liquide haute performance (HPLC) et avons évalué leur adéquation comme marqueurs inflammatoires chez les vaches laitières. Français Les paramètres de validation ont montré que la méthode HPLC répond aux exigences d'analyse de routine du tryptophane et de ses métabolites, la kynurénine et la nicotinamide, dans le sérum, avec une linéarité élevée dans les plages de travail et les limites de quantification respectives de 0,41 µmol L-1 pour la nicotinamide, 0,43 µmol L-1 pour la kynurénine et 3,40 µmol L-1 pour le tryptophane. Les variations intra-journalières et inter-journalières étaient respectivement de 2,3 et 3,6 % (nicotinamide), 3,1 et 6,3 % (kynurénine) et 1,9 et 5,2 % (tryptophane). La dégradation du tryptophane via la voie de la kynurénine a été étudiée chez 10 vaches laitières périparturientes sur deux groupes alimentaires pendant la période de transition. L'évolution des concentrations de tryptophane dans le sérum de vache autour du vêlage était similaire à celle observée chez les femmes enceintes, avec une diminution jusqu'à la naissance, suivie d'une augmentation et d'une normalisation des concentrations de tryptophane après l'accouchement. Cependant, l'augmentation des concentrations de kynurénine et une inclinaison simultanée du rapport kynurénine/tryptophane pendant la gestation n'ont pas pu être confirmées dans notre étude, à l'exception d'un pic du rapport kynurénine/tryptophane à la parturition qui pourrait être dû à l'activation induite par l'hormone de stress de la TDO hépatique et de l'IDO extrahépatique. Des mesures supplémentaires de l'interféron-γ et des glucocorticoïdes en tant qu'inducteurs putatifs de la TDO et de l'IDO seraient utiles pour vérifier l'adéquation du rapport kynurénine/tryptophane comme marqueur immunitaire chez les bovins.