Journal des sciences vétérinaires et du diagnostic médical

Développement et caractérisation des performances d'un ELISA sandwich à double antigène pour la détection des anticorps anti-Mycoplasma bovis

Haifeng Luo, Yanan Guo, Peng Sun, Shuqiang Guo, Shenghu He, Ping Zhao, Liangbei Ke et Heping Zhang

Résumé
Contexte : Mycoplasma (M.) bovis est un agent pathogène important du bétail, qui est associé à l'apparition de nombreuses maladies. Il n'existe actuellement aucun vaccin efficace pour prévenir les infections à M. bovis, et aucun
vaccin commercial n'est actuellement disponible, de sorte que l'approche de détection montre l'importance du contrôle de la maladie et de la surveillance de la prévalence de M. bovis.
Objectif : Développer et optimiser un ELISA, et évaluer les performances analytiques, diagnostiques et épidémiologiques.
Animaux : Échantillons de sérum de terrain (n = 368) provenant de 9 fermes bovines dans différents comtés de la province du Ningxia, en Chine.
Méthodes : Différents principes d'ELISA de détection d'anticorps ont été comparés, et les paramètres de l'ELISA double antigène sandwich (DAS) avec l'antigène recombinant P48 ont été optimisés. Tous
les échantillons de sérum ont été testés avec le DAS ELISA et le kit de référence. La précision, la sensibilité et la spécificité ont été évaluées à l'aide de la courbe ROC, et le box plot a été utilisé pour l'analyse de la prévalence et des performances épidémiologiques
.
Résultats : L'analyse de la courbe ROC pour le DAS ELISA a montré que l'aire sous la courbe était de 0,807 (p < 0,001). Français Avec une valeur seuil de DO 1,5, la sensibilité diagnostique était de 69,16 % (intervalle de confiance [IC] à 95 %, 59,5 % à 77,7 %) avec une spécificité diagnostique de 72,8 % (IC à 95 %, 67,0 % à 78,1 %). 6 des 9 fermes infectées par M. bovis ont été détectées, et le taux de pertinence était de 81,43 %, 75,00 %, 65,79 %, 33,33 %, 38,64 % et 72,84 % avec DAS ELISA respectivement, supérieur à 50,00 %, 50,00 %, 28,95 %, 3,33 %, 29,55, 40,74 % avec le kit de référence.

Conclusions : Le test DAS ELISA optimisé a fourni des performances sérodiagnostiques améliorées sans ambiguïté et une sensibilité et une spécificité suffisantes, et il constituera un outil amélioré pour la surveillance
et la prévention de M. bovis.