Journal des sciences vétérinaires et du diagnostic médical

Détection de Mycoplasma Spp. dans les cultures cellulaires par un protocole de réaction en chaîne par polymérase spécifique au genre

Claudia F. Lobos, María A. Martínez et Carlos O. Navarro

La contamination des cultures cellulaires par Mycoplasma spp. complique la recherche de base et le développement de produits biologiques. Les effets de ces bactéries sur les cellules cultivées sont des changements dans le métabolisme, les propriétés immunologiques et biochimiques, la croissance, la viabilité, etc. L'infection par Mycoplasma spp. sur les cultures cellulaires peut
ne pas être détectée par inspection visuelle ou microscopie commune. Il est donc important de procéder à des évaluations périodiques de routine avec une méthode rapide très sensible et très spécifique. En ce qui concerne l'énoncé précédent, ce mémoire s'est basé sur le diagnostic moléculaire de Mycoplasma spp., en détectant le gène 16S rRNA par la technique conventionnelle de réaction en chaîne par polymérase, sur des échantillons de culture cellulaire provenant de différents laboratoires de l'Université du Chili et de l'Institut de Santé Publique du Chili. Les résultats obtenus dans les contrôles positifs comme dans les contrôles négatifs ont permis la validation de cette méthode à la Faculté des Sciences Vétérinaires et son application sur des échantillons suspects de l'Institut des Sciences Biomédicales de l'Université du Chili. Cette découverte a été vérifiée par l'alignement des séquences nucléotidiques à l'aide des logiciels Clustal Ω et BLAST, tous deux gratuits en ligne, donnant un pourcentage d'identité nucléotidique de 97 % par rapport à Mycoplasma spp. de GeneBank®.