Journal des sciences vétérinaires et du diagnostic médical

Conception d'une technique de réaction en chaîne par polymérase (PCR) pour la détection de causes spécifiques de tuberculose (TB) chez les bovins laitiers et les humains

Hossain MZ, Rima UK, Islam MS, Habib MA, Chowdhury MGA, Saha PC, Chowdhury EH et Khan Mahna

Conception d'une technique de réaction en chaîne par polymérase (PCR) pour la détection de causes spécifiques de tuberculose (TB) chez les bovins laitiers et les humains

La tuberculose (TB) chez les bovins et les humains est causée par M. bovis, M. tuberculosis et M. avium subsp. var Paratuberculosis (M. paratuberculosis). Des bovins laitiers sélectionnés (N = 700) et des humains (N = 20) ont été testés à l'aide de tests à la tuberculine et d'imagerie aux rayons X. Une biopsie par aspiration de ganglions lymphatiques préscapulaires de bovins positifs au test à la tuberculine et d'urine, de toux, de liquide pleural et péritonéal d'humains suspects a été testée plus en détail à l'aide de la coloration de Ziehl Neelsen. L'ADN génomique de bovins positifs au test à la tuberculine (N = 23) et d'humains suspects (N = 20) a été testé à l'aide de réactions en chaîne par polymérase multiplex (PCR) ciblant l'ARNr 16 (1030 pb, 180 pb). Les résultats ont montré que 23 bovins et 11 humains étaient infectés par la tuberculose. Pour détecter l'infectiosité due à M. bovis et M. tuberculosis, des échantillons bovins (N = 11) et humains (N = 11) sélectionnés ont été testés par PCR uniplex ciblant respectivement les gènes MPB83 (600 pb) et H37Rv Rv3479HP (667 pb). Les résultats de la PCR ont montré que tous les échantillons bovins et sept échantillons humains ont généré un amplicon de 600 pb spécifique au gène MPB83. Deux ADN bovins et sept ADN humains ont généré des amplicons de 667 pb spécifiques au gène H37Rv Rv3479HP. Sept bovins ont été infectés par M. bovis et deux par M. tuberculosis. Deux bovins ont été co-infectés par M. bovis et M. paratuberculosis. Quatre humains ont été infectés par M. bovis et sept par M. tuberculosis. Le gène MPB83 est invariablement partagé par M. bovis et M. tuberculosis. Le protocole de PCR conçu pour cibler un fragment du gène H37Rv Rv3479HP (667 pb) est sélectif pour M. tuberculosis. Les résultats du séquençage ont montré une mutation ponctuelle dans les gènes 16srRNA, MPB83 et H37Rv Rv3479HP. Les analyses phylogénétiques des gènes sélectionnés de M. bovis et M. tuberculosis ont montré que les organismes appartenaient à la lignée 1. Le test intradermique à la tuberculine et la microscopie des frottis n'ont pas permis de différencier l'infectiosité due à M. bovis ou M. tuberculosis. La technique PCR conçue semble spécifique à M. tuberculosis et peut être utilisée pour détecter les causes de la tuberculose chez les mammifères et concevoir de futures stratégies de prévention en conséquence.