Journal international de recherche cardiovasculaire

Fiabilité test-retest de la quantification par cytométrie de flux des cellules endothéliales circulantes et des cellules progénitrices endothéliales dans les maladies cardiovasculaires

Joséphine Buescher, Fabian Weisrock, Max Fritschka, Sebastian Beckmann, Simon Litmeier, Elvis Tahirovic, Sara Radenovic, Andreas Busjahn, Thomas Krahn, Wilfried Dinh et Hans-Dirk Düengen

Les cellules endothéliales circulantes (CEC) et les cellules progénitrices endothéliales (EPC) gagnent en importance en tant que biomarqueurs de substitution quantifiables du dysfonctionnement endothélial (DE). L'absence d'une définition commune et, par conséquent, d'une méthode de quantification standardisée, a limité l'applicabilité clinique de ces biomarqueurs. Une méthode fiable, reproductible et pratique est nécessaire pour atteindre le plein potentiel de ces paramètres. L'objectif de cette étude était d'évaluer la fiabilité test-retest sur une courte période (~7 jours) de quantification par cytométrie de flux des CEC et des EPC dans le sang total humain de patients atteints de maladies cardiovasculaires. 100 patients (âge moyen 65 ans ± 10 ans, 30 femmes) ont été inclus dans une étude prospective composée de 4 groupes de patients : insuffisance cardiaque avec fraction d'éjection réduite (ICFEr ; n = 25), insuffisance cardiaque avec fraction d'éjection préservée (ICFEp ; n = 26), néphropathie diabétique (ND ; n = 25) et hypertension (HTA ; n = 24). De plus, 11 volontaires sains ont été inclus comme groupe témoin. Lors de 2 visites d'étude, un échantillon de sang a été prélevé, qui a subi une séquence identique de préparation et d'analyse. Français Les CEC (ADN+, CD45 dim, CD31+ et CD146+) et les EPC (CD45 dim, CD34 br, CD133+ et CD31+), la fiabilité du test-retest à court terme du FSC, la corrélation (corrélation intraclasse) et la concordance (graphique de Bland-Altman) des mesures obtenues lors des 2 visites d'étude ont été évaluées. Chez tous les patients, les médianes de CEC/ml et d'EPC/ml étaient respectivement de 12 (5e/95e percentile : 6/22) et 679 (447/1281) à la visite 1 et de 11 (6/24) et 736 (510/1105) à la visite 2 ; la corrélation intraclasse (CCI) était faible pour le nombre de CEC (0,106 ; CCI-95 % IC-0,08-0,29) et bonne pour le nombre d'EPC (0,9 ; 0,86–0,93). Chez les patients atteints d'ICFEp, l'ICC était faible pour le nombre de CEC (0,294 ; IC à 95 % -0,08-0,6) et modérément fort pour le nombre d'EPC (0,694 ; 0,43–0,85). Chez les patients atteints d'ICFEr, l'ICC était faible pour le nombre de CEC (0,076 ; -0,32–0,45) et excellent pour le nombre d'EPC (0,946 ; 0,88–0,98). Chez les patients atteints de DN, l'ICC était faible pour le nombre de CEC (-0,031 ; -0,44–0,37) et excellent pour le nombre d'EPC (0,946 ; 0,88–0,98). Chez les patients atteints d'HTA, l'ICC était faible pour le nombre de CEC (0,143 ; -0,27–0,51) et une force modérée pour le nombre d'EPC (0,668 ; 0,37–0,84). Chez les témoins sains, l'ICC était faible pour le nombre de CEC (0,378-0,26–0,78) et bonne pour le nombre d'EPC (0,846 ; 0,59–0,96). Un graphique de Bland-Altman a montré une corrélation positive des variations des différences et de l'augmentation du nombre médian de CEC ; il n'y avait pas de tendances distinctes pour le nombre médian d'EPC. Nos analyses indiquent que la quantification par cytométrie de flux des concentrations d'EPC est fiable chez les patients atteints d'ICFEp, d'ICFEr, de DN et d'HTA. La quantification des concentrations de CEC a montré une faible fiabilité test-retest dans tous les groupes de patients. Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour élucider la nature de ce résultat, qui pourrait être dû à une variabilité biologique plus élevée chez les patients atteints de dysfonction érectile sévère. Identifiant d'enregistrement de l'essai clinique : NCT02299960