Journal de recherche sur la pharmacie et l'administration de médicaments

Développement et validation d'une méthode chromatographique pour la quantification de l'isoniazide dans le plasma humain

Alshaikheid M, Fredj NB, Chaabane A, Chadli Z, Slama A, Boughattas N, Lassoued MA, Aouam K

Objectif : L'isoniazide (INH) est un traitement antituberculeux majeur, caractérisé par un index thérapeutique étroit et une grande variabilité intra et inter-patients. Ainsi, le suivi thérapeutique des médicaments (STM) de ce médicament est obligatoire afin d'optimiser l'efficacité et de minimiser l'apparition d'effets secondaires toxiques de ce médicament. Le but de la présente étude est de développer et de valider une méthode chromatographique simple pour la détermination de l'INH dans le plasma humain.

Méthodes : La chromatographie liquide haute performance a été réalisée à l'aide d'un chromatographe Ultimate 3000®. L'extraction de l'INH du plasma a été réalisée à l'aide d'acide trichloracétique (TCA). La nicotinamide a été utilisée comme étalon interne (EI). La phase mobile était constituée d'une solution tampon d'acétate d'ammonium (99 %) 0,05 M ajustée par de l'acide acétique glacial à pH 6 (99 %) et d'acétonitrile (1 %). La séparation chromatographique a été réalisée sur une colonne C18 (5 μm, 4,6 x 150 mm) à 20 °C. Les signaux ont été surveillés par un détecteur à barrette de diodes (DAD) à une longueur d'onde (λ) de 265 nm, à un débit de 1,2 ml/min.

Résultats : Les temps de rétention de l'INH et de l'IS étaient respectivement de 6,4 et 10,5. Les limites de détection et de quantification de l'INH étaient respectivement de 0,09 et 0,3 μg/ml. La présente méthode est spécifique et linéaire sur la plage de 0,5 à 8 μg/ml avec un coefficient de régression de 0,998. De plus, cette méthode est précise et exacte, comme le montrent les tests statistiques appropriés recommandés pour la validation des méthodes bioanalytiques.

Conclusion : Nous avons développé et validé une méthode simple, rapide et pratique pour la détermination de l’INH plasmatique chez les patients tuberculeux recevant ce traitement.