Journal international de recherche cardiovasculaire

Le dénosumab pourrait être un inhibiteur potentiel de la calcification des cellules interstitielles valvulaires in vitro

Daniel Alejandro Lerman, Sai Prasad et Nasri Alotti

Le dénosumab pourrait être un inhibiteur potentiel de la calcification des cellules interstitielles valvulaires in vitro

Objectif : Le dénosumab est un anticorps monoclonal entièrement humain et un nouvel agent antirésorptif qui agit en se liant au ligand activateur du récepteur du facteur nucléaire kappa-β (RANKL) et en inhibant la cascade de signalisation qui provoque la maturation, l'activité et la survie des ostéoclastes. Nous avons cherché à élucider l'effet du dénosumab dans le processus de calcification spontanée et induite dans un modèle in vitro de cellules interstitielles valvulaires porcines (CIV).

Matériel et méthodes : Les VIC ont été extraits de cœurs de porc frais par digestion en série par collagénase. La calcification spontanée des VIC a été augmentée in vitro par ajout de Na3PO4 ₍ 3 _mM , pH 7,4) et de différentes concentrations (0,1, 1 et 10 ng/ml) de facteur de croissance transformant bêta (TGFß). Le degré de calcification avant et après traitement par Denosumab a été estimé par coloration au rouge d'alizarine pour le dépôt de calcium et par coloration au rouge Sirius pour le collagène. Des techniques colorimétriques ont été utilisées pour déterminer quantitativement le dépôt de calcium et de collagène. Pour l'analyse statistique, nous avons utilisé SPSS et Microsoft Office Excel 2013.

Résultats : _Les CIV aortiques porcins in vitro ont été induits à calcifier par l'ajout de 3 mM Na3PO4 _, montrant une augmentation de 5,2 fois au 14e jour (P<0,001), ou de 3 mM Na3PO4 + 10 _{ng /ml de TGFβ, montrant une augmentation de 7 fois au 14e} jour (P<0,001). Le dénosumab a inhibé la calcification induite par 3 mM Na3PO4 _et 3 _mM Na3PO4 _{avec l'ajout de TGFß à 0,1, 1 ou 10 ng/ ml} à des niveaux de base uniquement à une concentration de 50 μg/ml (P<0,001).

Conclusion : Cette étude a démontré que le dénosumab pourrait être un inhibiteur potentiel de la calcification des VIC in vitro . Une meilleure compréhension des actions du dénosumab pourrait permettre d'identifier une nouvelle stratégie thérapeutique pour une intervention clinique contre la calcification de la valve aortique et la sténose aortique .