Journal des nanomatériaux et de la nanotechnologie moléculaire

Préparation d'anticorps anti-élastase conjugués à des points quantiques de 710 nm et à de l'isothiocyanate de fluorescéine pour l'immuno-analyse des cellules somatiques du lait

Zlatina Becheva et Tzonka Godjevargova

Préparation d'anticorps anti-élastase conjugués à des points quantiques de 710 nm et à de l'isothiocyanate de fluorescéine pour l'immuno-analyse des cellules somatiques du lait

Une nouvelle méthode de microscopie par immunofluorescence pour le comptage des neutrophiles et des cellules somatiques a été développée en utilisant un anticorps anti-élastase. Deux conjugués différents - un conjugué anticorps anti-élastase neutrophile bovine-isothiocyanate de fluorescéine et un conjugué anticorps anti-élastase neutrophile bovine-Quantum Dots 710 nm ont été préparés. Le couplage des Quantum Dots (QDs) et de l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC) à l'anticorps a été démontré par comparaison des spectres d'absorption ultraviolette et des spectres de fluorescence du conjugué et des composants initiaux. Les activités des conjugués ont été mesurées par ELISA indirect dans les mêmes conditions. Il a été constaté que la sensibilité de l'immuno-essai avec le conjugué QDs était supérieure à la sensibilité de l'immuno-essai avec le conjugué FITC. La stabilité au stockage du conjugué anticorps anti-élastase neutrophile bovine-QDs710nm et du conjugué anticorps anti-élastase neutrophile bovine-FITC a été étudiée. L'intensité de fluorescence résiduelle de l'anticorps anti-élastase-QDs était de 95 % au 30e jour, tandis que l'intensité du conjugué anticorps anti-élastase-FITC était réduite à 60 % le même jour. Les conjugués obtenus ont été appliqués dans un test réel avec des cellules somatiques de lait bovin. L'imagerie par fluorescence a prouvé que le conjugué QDs a une meilleure intensité de fluorescence que le conjugué FITC et est plus approprié pour la détermination des cellules somatiques dans le lait.