Journal des techniques immunologiques et des maladies infectieuses

Optimisation du test de flux latéral pour la détection du morbillivirus canin et application de la bandelette comme substitut d'échantillon

Monu Karki*, KK Rajak, Praveen Singh, Arfa Fayaz, Kiran, Mukesh Bhatt, Vishal Rai, Chris Einstein, Ajay Kumar Yadav et RP Singh

La maladie de Carré est une maladie émergente, causée par le morbillivirus canin (CDV) de la famille des Paramyxoviridae. Le virus a évolué en tant qu'agent pathogène multi-hôtes car il affecte de nombreuses espèces animales sauvages. Le développement de tests de diagnostic spécifiques et sensibles est la nécessité d'un programme de contrôle. Plusieurs tests de diagnostic sont disponibles pour la détection de l'antigène et de l'anticorps du CDV. Le test de flux latéral (LFA) est le test de diagnostic au point de service le plus prometteur en raison de sa spécificité, de sa facilité d'utilisation et de son résultat instantané. Cette étude a été conçue pour développer un test de flux latéral en utilisant l'anticorps monoclonal (mAb) développé en interne contre la protéine de nucléocapside (N) de l'isolat « CDV/dog/bly/Ind/2018 », qui représente les souches en circulation en Inde. Les deux mAbs inclus dans l'étude ont montré une affinité de liaison élevée dans l'ELISA indirect et le test dot blot. Français Sur deux, un mAb a été sélectionné en raison de son affinité de liaison comparativement plus élevée dans le format LFA et d'une liaison non spécifique moindre à la matrice biologique et aux composants du tampon. Les échantillons cliniques frais collectés sur place ont été clairement détectés par le LFA, tandis que les échantillons stockés avec un titre réduit du virus ont montré des résultats incohérents. De plus, les échantillons de sang ont montré une distinction claire entre positif et négatif par rapport aux écouvillons et aux homogénats de tissus. L'extraction de l'ARN à partir de la bandelette a été réussie avec quelques modifications dans la méthode d'extraction de l'ARN Trizol et les fragments des gènes N et H ont été amplifiés. Par conséquent, l'étude conclut que le LFA est adapté à la détection de l'antigène CDV dans les conditions de terrain et que les bandelettes peuvent être utilisées comme substitut d'échantillon pour l'étude moléculaire.