Journal des techniques immunologiques et des maladies infectieuses

Dosage immunologique sur microsphères de fluorescence pour la détection d'anticorps dirigés contre le virus du syndrome dysgénésique et respiratoire porcin et le circovirus porcin de type 2 à l'aide de protéines A, G et A/G

Mohammad M Hossain et Raymond RR Rowland

L'objectif de cette étude était le développement d'un immuno-essai sur microsphères à fluorescence multiplex (FMIA) pour la détection d'anticorps IgG spécifiques du virus du syndrome dysgénésique et respiratoire porcin (PRRSV) et du circovirus porcin de type 2 (PCV2) par incorporation de conjugués non spécifiques à l'espèce, protéines A, G et A/G, à la place de l'anticorps secondaire. Au total, 205 échantillons de sérum obtenus à partir de porcs infectés expérimentalement par le PRRSV et/ou le PCV2 ont été testés. Pour la production d'antigènes recombinants, la nucléoprotéine (N) du PRRSV et la protéine de capside (CP) du PCV2 ont été exprimées dans Escherichia coli et purifiées sur une colonne d'affinité au nickel. Les protéines purifiées ont été couplées de manière covalente à des billes de microsphères carboxylées. Quatre antigènes cibles ont été assemblés en un seul multiplex et testés contre des sérums de porcs infectés ou co-infectés par le PRRSV ou le PCV2. Les protéines A, G et A/G ont été testées à la place du conjugué secondaire d'IgG porcine. Tous les conjugués étaient capables de détecter des anticorps et la détection des réponses IgG contre les cibles antigéniques PRRSV et PCV2 variait avec A> A/G> G. En l'absence de réactifs spécifiques à l'espèce, l'incorporation des protéines A, G et A/G fournit des substituts appropriés.